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目的
探讨环腺苷二磷酸核糖(cyclic adenosine diphosphate ribose, cADPR)协同热刺激对小鼠下丘脑催产素神经细胞内钙离子浓度变化的调节作用。
方法提取小鼠下丘脑视上核进行体外催产素神经元培养,胞外给予cADPR并伴随不同温度梯度(以2 ℃的梯度差分别将目标温度设置为28、34、37和39 ℃)及抑制剂(Ryanodine, 8-bromo-cADPR,2-APB)的条件下,利用钙离子荧光成像系统检测胞浆内钙离子浓度的变化情况。另外,通过胞外给予催产素的刺激进而检测热敏感神经元胞浆内钙离子浓度的变化情况。
结果细胞外给予100 μmol/L cADPR并且伴随升温至37 ℃时,胞内钙离子浓度增加,39 ℃时升高更为明显,与胞内Ca2+基础相比较分别升高达125%和151%(P<0.05)。在相同条件下,腺苷二磷酸核糖和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸诱发的胞内钙离子浓度升高现象类似于cADPR,但程度较弱。瞬时受体电位M2通道阻滞剂2-APB可显著阻断以上反应。100 nmol/L催产素的刺激可以使热敏感神经元胞内出现一种相对平缓且持续的Ca2+升高。
结论热温度依赖的环腺苷二磷酸核糖/瞬时受体电位M2介导的钙内流是调控催产素神经元胞内钙离子浓度升高的机制,有利于催产素的分泌。