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目的
探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子－抗原肽的方法及其免疫功能。
方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞，经盐析粗提蛋白及透析后，采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS－PAGE)分析伴侣分子－抗原肽表达量，采用溴化氰活化琼脂糖凝胶4B亲和层析分离、纯化伴侣分子－抗原肽，采用反向高压液相色谱、SDS－PAGE和Western blot法进行蛋白纯度分析，采用淋巴细胞增殖实验和细胞毒活性实验检测伴侣分子－抗原肽的免疫活性。
结果成功制备并鉴定胃癌干细胞的伴侣分子－抗原肽，主要组分为HSP60－抗原肽、HSP70－抗原肽、HSP90－抗原肽和HSP110－抗原肽。0.75 μg HSP70－抗原肽、1.00 μg HSP70－抗原肽和1.00 μg HSP90－抗原肽对淋巴细胞有明显的增殖作用，其A490值分别为0.26±0.03、0.45±0.05和0.32±0.04，而相应剂量的HSP60－抗原肽和HSP110－抗原肽不能激活淋巴细胞。1.00 μg HSP70－抗原肽组和1.00 μg HSP70组的细胞杀伤率分别为(45.0±2.0)%和(16.0±2.0)%,差异有统计学意义(P＝0.012)。1.00 μg HSP90－抗原肽组和1.00 μg HSP90组的细胞杀伤率分别为(36.0±5.0)%和(13.0±4.0)%，差异有统计学意义(P＝0.048)。
结论胃癌细胞中伴侣分子－抗原肽含量极低，而胃癌干细胞中伴侣分子－抗原肽含量明显增多，经提纯后可制备纯度较高的伴侣分子－抗原肽。提取的伴侣分子－抗原肽具有较强的免疫原性，可在体外制作瘤苗，可能在胃癌靶向治疗上有较好的应用价值。