犬细小病毒 VP2基因的克隆与生物信息学分析

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lv0550159
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本研究旨在克隆犬细小病毒 VP2(Canine parvovirus VP2, CPV-VP2)基因,构建克隆载体 pMD18-T-VP2,分析其生物信息学特征.以犬细小病毒(CPV)阳性病犬血液基因组病毒 DNA 为模板,PCR 扩增CPV-VP2基因,通过 TA 克隆获得 pMD18-T-VP2重组质粒,测序后对其进行生物信息学分析.结果表明:(1) CPV-VP2完整的开放阅读框由1755个核苷酸组成,共编码585个氨基酸残基,其序列同源性与浣熊最高,达97.6%;(2)信号肽在线预测认为,CPV-VP2基因无信号肽;(3) CPV-VP2大多数氨基酸偏好以 T、A 结尾的密码子;(4) CPV-VP2蛋白可能存在7个糖基化位点,其丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸分别存在8个、10个和7个磷酸化位点;(5) CPV-VP2可能存在76个 B 细胞抗原表位;(6) CPV-VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;(7) CPV-VP2蛋白二级结构的琢-螺旋区域占9.93%、茁-折叠区域占24.49%、无规则卷曲区域占65.58%;(8) CPV-VP2蛋白三级结构存在多个螺旋和折叠区域,主要以无规则卷曲为主.本研究为制定CPV-VP2基因原核或真核高效表达策略提供了参考资料,并为进一步制备 CPV 胶体金快速诊断试纸条和基因工程疫苗奠定了基础.
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