【摘 要】
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目的：探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系.方法：比较TGF-β2对细胞生长的影响.利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4 mRNA的相对表达量,筛选合适的TGF-β2干预浓度.采用Western blot检测心肌细胞组蛋白H3乙酰化水平乙酰化H3(acH3)蛋白的表达差
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院心血管内科与小儿心血管病学研究室 400014
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的：探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系.方法：比较TGF-β2对细胞生长的影响.利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4 mRNA的相对表达量,筛选合适的TGF-β2干预浓度.采用Western blot检测心肌细胞组蛋白H3乙酰化水平乙酰化H3(acH3)蛋白的表达差异.染色质免疫共沉淀(CHIP)Real-time PCR检测Mef2c和GATA4启动子区与acH3结合DNA的相对表达水平.比色分析法检测TGF-β2对心肌细胞的总体组蛋白乙酰化酶(HATs)活性的影响.结果：①TGF-β2干预组相对于对照组心肌细胞的增殖能力增强(P＜0.05).②心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4 mRNA的相对表达量随着TGF-β2浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在5μg/L的浓度时均达到最高,Mef2cmRNA相对表达量是对照组的1.8倍,GATA4 mRNA是对照组的2.3倍(P＜0.05).③TGF-β2干预72h后acH3蛋白表达量是对照组的4倍(P＜0.05),HATs活性是对照组的1.34倍(P＜0.05).④TGF-β2干预组Mef2c和GATA4启动子区组蛋白H3的乙酰化水平分别是对照组的2.56和2.16倍(P＜0.05).结论：5μg/L TGF-β2可以促进心肌细胞H9C2的分裂与增殖,并上调心脏相关转录因子Mef2c和GATA4的表达,组蛋白H3乙酰化水平的升高可能是Mef2c和GATA4表达上调的机制之一.
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