应用降落PCR和正交设计优化甘蔗“割手密”SSR-PCR反应体系

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甘蔗野生种割手密抗逆性强,在甘蔗抗逆育种中具有较好的应用前景;割手密SSR分子标记技术体系的建立及优化可为割手密指纹图谱绘制、种质鉴定、遗传多样性及亲缘关系分析提供技术支持。本研究以21份割手密材料用改良CTAB法提取DNA,采用降落PCR和正交试验设计对扩增反应体系主要成分的浓度(DNA模板,引物,Mg2+,d NTPs,Taq聚合酶)进行了优化。结果表明建立的割手密Touchdown SSR-PCR分子标记技术体系操作简便,扩增条带清晰且多态性丰富,有较强的稳定性和可重复性,可为割手密资源的相关研究提供技术支持。 Sugarcane sugarcane wild cut strong resistance to strong resistance in the sugarcane anti-retrograde breeding has a good prospect; Secant secret SSR molecular marker technology system can be established and optimized fingerprinting mapping, germplasm identification, genetic Diversity and kinship analysis to provide technical support. In this study, 21 Cynodon dactylon materials were extracted by modified CTAB method, and the concentration of DNA (primer, Mg2 +, dNTPs, Taq polymerase) optimization. The results showed that the established Touchdown SSR-PCR molecular marker technology was simple and convenient to operate, the amplified bands were clear and the polymorphism was abundant, and the stability and repeatability were strong. Technical Support.
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