Rab7在乳腺癌细胞中的表达及对信号EGFR的影响

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目的:Rab7在两种乳腺癌细胞中的表达以及其对EGFR信号的影响.方法:培养乳腺癌细胞MCF-7与MDA-MB231,运用Western blot法检测Rab7在乳腺癌细胞MCF-7与MDA-MB231中的表达.通过脂质体转染法转染乳腺癌细胞MCF-7,筛选稳定表达质粒,运用Real-time PCR法检测siRNA对Rab7的干扰效果.MTT实验检测干扰Rab7后对乳腺癌MCF-7细胞生长情况的影响.Western blot法检测干扰Rab7后对MCF-7细胞中EGFR表达量的影响.结果:(1)Western blot检测结果示,Rab7在乳腺癌MCF-7与MDA-MB231细胞中均有表达,且在MCF-7细胞中高表达,与MDA-MB231细胞相比较,有统计学意义(P<0.05).(2)Real-time PCR检测结果示,siRNA能够有效干扰Rab7的表达.(3)MTT实验结果示,与无干扰试剂的non-silencing组相比,Rab7-siRNA细胞组的增值能力增强.(4)Western blot结果表明,与无干扰组相比比较,干扰组中的EGFR表达量明显增多,且在25、60min时,有统计学意义(P<0.05).结论:(1)Rab7在乳癌细胞MCF-7与MDA-MB231中均有表达,且在MCF-7细胞中高表达.(2)瞬时转染的干扰因子成功地沉默了Rab7,且沉默后的Rab7基因促进了细胞MCF-7的生长,促使EGFR的蛋白表达量增加.
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