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目的：建立同时测定补乌酊中4种补骨脂类成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸（梯度洗脱）,流速为1 ml/min,检测波长为246 nm,柱温为30℃,进样量为15μl。结果：异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素的检测质量浓度线性范围分别为13.00~208、26.00~416、24.50~392、37.88~606μg/ml（r≥0.999 6）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2.00%;加样回收率分别为95.