烟草吡哆胺-丙酮酸转氨酶的部分纯化与表征

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通过冷冻干燥、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephadex G-100凝胶过滤柱层析,SP葡聚糖凝胶C-25阳离子交换柱层析等分离纯化技术,对烟草吡哆胺-丙酮酸转氨酶进行分离纯化。采用苯肼衍生化方法检测活性,并对其基本酶学性质进行分析。结果显示:该酶被纯化了92.34倍;最适温度为70℃,最适pH为9.0。在pH7.0~9.0内稳定且热稳定性较好,80℃保温3h仍有51.55%的酶活力;在最适反应条件下,测得反应底物吡哆胺和丙酮酸的Km值分别为6.337mmol
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