【摘 要】
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目的 探讨miR-342-3p对滋养细胞增殖、侵袭及迁移的影响,阐明miR-342-3p与血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor α,PDGFRA)的靶向关系.方法 以人正常绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo为研究对象,实验分为NC组(转染miR-NC空质粒)和miR-342-3p组(转染miR-342-3p-mimics).MTT检测细胞增殖能力;Transwell小室实验法检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期;采用实时荧光
【机 构】
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海南医学院第一附属医院产科,海南海口 570100;海南医学院第一附属医院产科,海南海口 570100;海南医学院组胚教研室,海南海口 570100
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目的 探讨miR-342-3p对滋养细胞增殖、侵袭及迁移的影响,阐明miR-342-3p与血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor α,PDGFRA)的靶向关系.方法 以人正常绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo为研究对象,实验分为NC组(转染miR-NC空质粒)和miR-342-3p组(转染miR-342-3p-mimics).MTT检测细胞增殖能力;Transwell小室实验法检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期;采用实时荧光定量PCR检测细胞中miR-342-3p、 BCL-2、 Caspase-3和PDGFRA基因mRNA表达水平Western blot检测细胞BCL-2、Caspase-3和PDGFRA表达水平.生物信息预测miR-342-3p与PDGFRA的靶向作用关系,并使用荧光素酶报告实验验证.结果 与NC组相比,48h和72 h时,miR-342-3p组细胞增殖能力明显降低(P<0.01).与NC组相比,miR-342-3p组G1期细胞明显升高,S期细胞明显减少(P<0.01).与NC组相比,miR-342-3p组细胞迁移和侵袭能力明显降低(P<0.01),miR-342-3p组细胞BCL-2、PDGFRA蛋白表达水平明显降低,Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01),miR-342-3p组细胞BCL-2、PDGFRA基因mRNA表达水平明显降低,Caspase-3基因mRNA表达水平明显升高(P<0.01).双荧光素酶报告基因检测结果提示PDGFRA为miR-342-3p的靶基因.结论 本研究表明,miR-342-3p可靶向PDGFRA,抑制滋养层细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡.
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