结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤酵母中的融合表达及其活性研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：MaoZeDongNiMaBi2005

【摘要】

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为了获得结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的高效表达,将人α-2a干扰素基因、结核分枝杆菌esat-6基因经PCR扩增并加上相应的酶切位点,两基因之间的DNA接头编码肠激酶识

【作者】

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刘林赵志安王洪海宋大新

【机构】

：

复旦大学生命科学学院

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

ESAT-6蛋白人α-2a干扰素分泌型载体酵母SMD1168 融合表达 ESAT-6 IFN α-2a secretion vector yeast

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

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为了获得结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的高效表达,将人α-2a干扰素基因、结核分枝杆菌esat-6基因经PCR扩增并加上相应的酶切位点,两基因之间的DNA接头编码肠激酶识别的多肽,DNA经酶切连接插入分泌型载体pPIC9K,将重组表达质粒pPIC9K-α2a-esat6用Sal Ⅰ单酶切之后,电击转入Pichia pastoris SMD1168中,采用G418梯度筛选获得高抗性转化子.以甲醇作为诱导物,发酵4d后取上清,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定并分析表达产物的干扰素

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