【摘 要】
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目的:动态检测激活正常T细胞表达和分泌的调节物(regulated on activation normal T expressed and secreted,RANTES)和酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(secreted protein,acidic a
【机 构】
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首都医科大学附属北京同仁医院,中国医学科学院
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目的:动态检测激活正常T细胞表达和分泌的调节物(regulated on activation normal T expressed and secreted,RANTES)和酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(secreted protein,acidic and rich in cysteine,SPARC)在异体角膜移植排斥反应中的表达,为角膜移植排斥反应的早期诊断提供依据.方法:首先建立大鼠异体角膜移植动物模型,并设同体角膜移植、角膜碱烧伤模型为对照组,在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA.分别进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、电泳、半定量检测RANTES和SPARC mRNA的表达水平.然后酶切验证表达结果.结果:(1)正常角膜上皮细胞未见RANTES基因表达,可见SPARC基因的低表达;(2)异体角膜移植3天后各时间点均见排斥眼RANTES基因的高表达,同体移植及碱烧伤后未见表达;(3)SPARC在角膜移植及碱烧伤后均见较高水平表达,且与正常细胞表达有显著差异;(4)用RT-PCR方法检测基因变化诊断排斥反应早于裂隙灯检查结果.结论:大鼠角膜上皮RANTES mRNA表达上调与角膜移植排斥反应特异性相关.同时,SPARC在角膜移植排斥反应、碱烧伤和创伤过程中具有高水平表达.依时间顺序,RANTES和SPARC早期高表达早于临床观察的排斥反应至少一周.由此,选择性对细胞因子mRNA扩增,是早期诊断角膜移植排斥反应的有效方法.
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