论文部分内容阅读
摘 要 目的：观察柚皮提取物对寻常型银屑病的治疗效果及患者外周循环血miRNA的差异表达。方法：选择50例寻常型银屑病患者随机分为试验组（柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药）和对照组（西药局部用药）。治疗疗程为8周，观察治疗效果和不良情况的发生状况。结果：治疗组的PASI 改善率明显高于对照组，PASI评分降低明显优于对照组（P<0.05）；两组寻常型银屑病患者血浆中5个差异性miRNAs，分别与组内治疗前后做出对比，结果差异均有显著性意义（P<0.05）。结论：柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药比单纯西药局部用药治疗寻常型银屑病疗效明显，且对寻常型银屑病患者5个特异性miRNA有显著性调控作用。
关键词 寻常型银屑病 miRNA差异表达 疗效
中图分类号：R758.63 文献标识码：B 文章编号：1006-1533（2017）21-0031-03
Differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris and clinical intervention of pomelo extract*
XIANG Yu1**， WU Xing2***， JIANG Minying1， HAN Huali1， WU Jinhui3（1. Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China； 2. Guangzhou University of Chinese Medicine，
Guangzhou 510006， China； 3. Fujiang Pinghe Nanhai Biotechnology Company， Zhangzhou 363000， China）
ABSTRACT Objective： To explore the differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris patients and the effect of the pummelo pericarp extract. Methods： Fifty patients with psoriasis vulgaris were randomly divided into an experimental group （the pomelo peel antipruritic lotion， the external wash combined with topical use of Western Medicine） and a control group （only topical use of Western medicine）. The course of treatment was lasted 8 weeks and the treatment effect and adverse reactions were observed. Results： The improvement rate of PASI was significantly higher and the decrease of PASI scores was significantly better in the treatment group than in the control group （P<0.05）. The comparison of the differences of 5 miRNAs in plasma of the patients in a group before and after treatment showed to have significance （P<0.05）. Conclusion： The efficacy in the experimental group is much better than that in the control group with significant regulatory effect on 5 specific miRNA in patients with psoriasis vulgaris.
KEy WORDS psoriasis vulgaris； miRNA significant expression； curative effect
銀屑病，以皮肤红斑、丘疹或斑片上盖有银白色麟屑以及不同程度的瘙痒为主要表现，发病率占世界人口的 0.1%～3%[1-2]。随着国内外学术界在小分子 RNA 领域研究的逐步深入，发现多种miRNA在皮肤生理病理等过程中发挥了极其重要的作用，如皮肤肿瘤、银屑病、特应性皮炎等，因此可以通过对miRNA的研究深入了解疾病的发病机制[3]。银屑病严重影响着患者的工作生活，很大程度上降低了患者的生活质量[4]。本研究对银屑病患者使用柚皮王止痒润肤沐浴露，取得了较好的效果，现报道如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
所有病例均来源于广东药科大学附属门诊部寻常型银屑病病人，样本量为50例。年龄在18～65岁，7分0.05，表1）。
1.2 方法
試验组给予柚皮王止痒润肤沐浴露外洗，叠加西药局部用药（国际公认用于中重度患者的钙泊三醇倍他米松软膏），对照组给予单纯西药局部用药。
1.3 疗效判定方法
主要结局指标：治疗和随访期间银屑病的复发率、银屑病皮损面积与严重程度指数（psoriasis area and severity index， PASI），客观指标：miRNA（miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a），次要结局指标：首次复发间隔时间、起效时间、视觉模拟评分（visual analogue scale， VAS）、皮肤病生活质量指数（dermatology life quality index， DLQI）。
1.4 miRNA样本提取和检测
采用Trizol法提取血浆总RNA，行 RT 反应。cDNA合成，按试剂盒（superscript II reverse transcriptase， Invitr-ogen公司）说明，采用 Oligo（dT）逆转录。荧光定量PCR反应，选取miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a，检测各样本中的miRNA的相对表达水平。
1.5 统计学方法
2 结果
2.1 PASI改善率比较
治疗组的PASI 有效率明显高于对照组（P<0.05），且未出现加重的病例（表2）。
2.2 PASI 评分比较
治疗前两组PASI评分无显著差异，治疗后两组均降低，以治疗组降低更显著（P<0.05，表3）。
2.3 差异性miRNAs表达分析结果
治疗组miRNA-146a、micRNA-210、miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调（P<0.05）；miRNA-142-3p与治疗前比较表达上调（P<0.05）。
两组治疗前后的外周血浆中miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a水平的差值比较差异均无统计学意义（P>0.05）。
2.4 DLQI评分及VAS评分比较
治疗后两组DLQI和VAS评分均有下降，但组间比较差异不显著（P>0.05，表4、表5）。
3 讨论
前期试验证明，长期使用柚皮王止痒润肤沐浴露可缓解皮肤瘙痒及干燥等症状，在一定程度上提高银屑病患者生活质量[5-6]。随着医学模式逐渐向“生理-心理-社会”模式转化，中西医结合治疗、生理、心理、社会综合治疗成为中西医结合治疗银屑病的方向[7]。
本研究结果表明，治疗组用药对5个特异性miRNA有显著性调控作用。其中miRNA-146a，microRNA-210，miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调，miRNA-142-3p与治疗前比较表达上调。因此我们推测，治疗组也许可以通过调控某些miRNAs影响某些分子、蛋白的表达，从而影响炎性因子变化，但具体过程及通路仍有待今后进一步研究[8-10]。此外，本研究中治疗组寻常型银屑病PASI评分改善程度达52%，临床疗效明显优于对照组。治疗组可有效改善患者的DLQI和VAS，即能有效改善患者的生活质量。
由于时间和经费的限制，本研究尚未对差异表达的miRNAs与其靶基因及基因调控功能展开深入研究。在今后的工作中，我们将进一步探讨与银屑病相关的miRNA基因缺失或突变，以期寻找特定的靶基因，全面了解miRNA在细胞中的功能机制。
参考文献
[1] 蒋俊青， 顾安康. miRNA-210在寻常型银屑病皮损中的表达研究[J]. 中国实验诊断学， 2016， 20（9）： 1466-1468.
[2] 徐虹， 张亚敏， 孙华， 等. 针刺对脑缺血大鼠外周血miRNA-126和VEGF表达的干预作用[J]. 针灸临床杂志， 2016， 32（10）： 80-84.
[3] 王晓华， 饶朗， 郑道城， 等. 4种microRNAs在寻常型银屑病患者外周血中的表达[J]. 皮肤性病诊疗学杂志， 2016， 23（6）： 372-375.
[4] 项瑜， 吴星， 卢传坚， 等. 银屑病的中西医结合治疗策略[J]. 中国医学文摘：皮肤科学， 2014， 31（3）： 143-145.
[5] 项瑜， 徐贤琦， 李其林. 柚皮在皮肤美容中的应用[J]. 皮肤性病诊疗学杂志， 2016， 23（4）： 292-294.
[6] 张芳， 姜媛媛， 杨洋， 等. 柚提取物含量测定及其抗氧化、抑菌活性研究[J]. 食品工业科技， 2015， 36（3）： 65-69.
[7] 黄乾元， 徐玲玲， 李斌. 中医药治疗银屑病的研究进展[J].内蒙古中医药， 2013， 32（14）： 106-107.
[8] 梅沉成， 张云璧， 霍春波， 等. miRNA调控银屑病角质形成细胞增殖机制的研究进展[J]. 中国麻风皮肤病杂志， 2016， 32（11）： 699-701.
[9] 汪海珍， 张予晋， 杨志波. 润肤保湿软膏对血虚风燥证银屑病皮肤屏障功能干预作用及机制的研究[J]. 湖南中医药大学学报， 2016， 36（6）： 78-81.
[10] 王丹， 杨志波， 谌莉媚. 寻常型银屑病miR-155与Th17型细胞因子相关及竹黄颗粒对其的干预作用[J]. 江西中医药大学学报， 2016， 28（6）： 17-22.
关键词 寻常型银屑病 miRNA差异表达 疗效
中图分类号：R758.63 文献标识码：B 文章编号：1006-1533（2017）21-0031-03
Differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris and clinical intervention of pomelo extract*
XIANG Yu1**， WU Xing2***， JIANG Minying1， HAN Huali1， WU Jinhui3（1. Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China； 2. Guangzhou University of Chinese Medicine，
Guangzhou 510006， China； 3. Fujiang Pinghe Nanhai Biotechnology Company， Zhangzhou 363000， China）
ABSTRACT Objective： To explore the differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris patients and the effect of the pummelo pericarp extract. Methods： Fifty patients with psoriasis vulgaris were randomly divided into an experimental group （the pomelo peel antipruritic lotion， the external wash combined with topical use of Western Medicine） and a control group （only topical use of Western medicine）. The course of treatment was lasted 8 weeks and the treatment effect and adverse reactions were observed. Results： The improvement rate of PASI was significantly higher and the decrease of PASI scores was significantly better in the treatment group than in the control group （P<0.05）. The comparison of the differences of 5 miRNAs in plasma of the patients in a group before and after treatment showed to have significance （P<0.05）. Conclusion： The efficacy in the experimental group is much better than that in the control group with significant regulatory effect on 5 specific miRNA in patients with psoriasis vulgaris.
KEy WORDS psoriasis vulgaris； miRNA significant expression； curative effect
銀屑病，以皮肤红斑、丘疹或斑片上盖有银白色麟屑以及不同程度的瘙痒为主要表现，发病率占世界人口的 0.1%～3%[1-2]。随着国内外学术界在小分子 RNA 领域研究的逐步深入，发现多种miRNA在皮肤生理病理等过程中发挥了极其重要的作用，如皮肤肿瘤、银屑病、特应性皮炎等，因此可以通过对miRNA的研究深入了解疾病的发病机制[3]。银屑病严重影响着患者的工作生活，很大程度上降低了患者的生活质量[4]。本研究对银屑病患者使用柚皮王止痒润肤沐浴露，取得了较好的效果，现报道如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
所有病例均来源于广东药科大学附属门诊部寻常型银屑病病人，样本量为50例。年龄在18～65岁，7分
1.2 方法
試验组给予柚皮王止痒润肤沐浴露外洗，叠加西药局部用药（国际公认用于中重度患者的钙泊三醇倍他米松软膏），对照组给予单纯西药局部用药。
1.3 疗效判定方法
主要结局指标：治疗和随访期间银屑病的复发率、银屑病皮损面积与严重程度指数（psoriasis area and severity index， PASI），客观指标：miRNA（miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a），次要结局指标：首次复发间隔时间、起效时间、视觉模拟评分（visual analogue scale， VAS）、皮肤病生活质量指数（dermatology life quality index， DLQI）。
1.4 miRNA样本提取和检测
采用Trizol法提取血浆总RNA，行 RT 反应。cDNA合成，按试剂盒（superscript II reverse transcriptase， Invitr-ogen公司）说明，采用 Oligo（dT）逆转录。荧光定量PCR反应，选取miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a，检测各样本中的miRNA的相对表达水平。
1.5 统计学方法
2 结果
2.1 PASI改善率比较
治疗组的PASI 有效率明显高于对照组（P<0.05），且未出现加重的病例（表2）。
2.2 PASI 评分比较
治疗前两组PASI评分无显著差异，治疗后两组均降低，以治疗组降低更显著（P<0.05，表3）。
2.3 差异性miRNAs表达分析结果
治疗组miRNA-146a、micRNA-210、miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调（P<0.05）；miRNA-142-3p与治疗前比较表达上调（P<0.05）。
两组治疗前后的外周血浆中miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a水平的差值比较差异均无统计学意义（P>0.05）。
2.4 DLQI评分及VAS评分比较
治疗后两组DLQI和VAS评分均有下降，但组间比较差异不显著（P>0.05，表4、表5）。
3 讨论
前期试验证明，长期使用柚皮王止痒润肤沐浴露可缓解皮肤瘙痒及干燥等症状，在一定程度上提高银屑病患者生活质量[5-6]。随着医学模式逐渐向“生理-心理-社会”模式转化，中西医结合治疗、生理、心理、社会综合治疗成为中西医结合治疗银屑病的方向[7]。
本研究结果表明，治疗组用药对5个特异性miRNA有显著性调控作用。其中miRNA-146a，microRNA-210，miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调，miRNA-142-3p与治疗前比较表达上调。因此我们推测，治疗组也许可以通过调控某些miRNAs影响某些分子、蛋白的表达，从而影响炎性因子变化，但具体过程及通路仍有待今后进一步研究[8-10]。此外，本研究中治疗组寻常型银屑病PASI评分改善程度达52%，临床疗效明显优于对照组。治疗组可有效改善患者的DLQI和VAS，即能有效改善患者的生活质量。
由于时间和经费的限制，本研究尚未对差异表达的miRNAs与其靶基因及基因调控功能展开深入研究。在今后的工作中，我们将进一步探讨与银屑病相关的miRNA基因缺失或突变，以期寻找特定的靶基因，全面了解miRNA在细胞中的功能机制。
参考文献
[1] 蒋俊青， 顾安康. miRNA-210在寻常型银屑病皮损中的表达研究[J]. 中国实验诊断学， 2016， 20（9）： 1466-1468.
[2] 徐虹， 张亚敏， 孙华， 等. 针刺对脑缺血大鼠外周血miRNA-126和VEGF表达的干预作用[J]. 针灸临床杂志， 2016， 32（10）： 80-84.
[3] 王晓华， 饶朗， 郑道城， 等. 4种microRNAs在寻常型银屑病患者外周血中的表达[J]. 皮肤性病诊疗学杂志， 2016， 23（6）： 372-375.
[4] 项瑜， 吴星， 卢传坚， 等. 银屑病的中西医结合治疗策略[J]. 中国医学文摘：皮肤科学， 2014， 31（3）： 143-145.
[5] 项瑜， 徐贤琦， 李其林. 柚皮在皮肤美容中的应用[J]. 皮肤性病诊疗学杂志， 2016， 23（4）： 292-294.
[6] 张芳， 姜媛媛， 杨洋， 等. 柚提取物含量测定及其抗氧化、抑菌活性研究[J]. 食品工业科技， 2015， 36（3）： 65-69.
[7] 黄乾元， 徐玲玲， 李斌. 中医药治疗银屑病的研究进展[J].内蒙古中医药， 2013， 32（14）： 106-107.
[8] 梅沉成， 张云璧， 霍春波， 等. miRNA调控银屑病角质形成细胞增殖机制的研究进展[J]. 中国麻风皮肤病杂志， 2016， 32（11）： 699-701.
[9] 汪海珍， 张予晋， 杨志波. 润肤保湿软膏对血虚风燥证银屑病皮肤屏障功能干预作用及机制的研究[J]. 湖南中医药大学学报， 2016， 36（6）： 78-81.
[10] 王丹， 杨志波， 谌莉媚. 寻常型银屑病miR-155与Th17型细胞因子相关及竹黄颗粒对其的干预作用[J]. 江西中医药大学学报， 2016， 28（6）： 17-22.