【摘 要】
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目的 研究丁公藤注射液(injection erycibe,IE)对骨质疏松性大鼠骨折愈合的促进作用及其作用机制。方法 通过卵巢切除术和骨折术建立骨质疏松性骨折大鼠模型,50只健康SD大鼠(♀)随机分为假手术组、模型组和1,2,4 mL·kg–1IE组,检测大鼠股骨骨密度、生物力学指标和血清钙、碱性磷酸酶含量,HE染色观察大鼠骨骼病理组织学变化。对分离的骨髓间充质干细胞(mesenchymal s
【机 构】
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商丘医学高等专科学校临床医学院中医教研室
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目的 研究丁公藤注射液(injection erycibe,IE)对骨质疏松性大鼠骨折愈合的促进作用及其作用机制。方法 通过卵巢切除术和骨折术建立骨质疏松性骨折大鼠模型,50只健康SD大鼠(♀)随机分为假手术组、模型组和1,2,4 mL·kg–1IE组,检测大鼠股骨骨密度、生物力学指标和血清钙、碱性磷酸酶含量,HE染色观察大鼠骨骼病理组织学变化。对分离的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)进行药物干预,分为对照组、5,10,20 mg·L–1 IE组、诱导组(成骨诱导培养基诱导分化)、NC siRNA组、NCK1 siRNA组、IE+NC siRNA组和IE+NCK1 siRNA组,采用MTT检测MSCs增殖,RT-qPCR检测成骨分化相关基因ALP、Runx2和Osterix mRNA水平,Western blotting检测NCK1和p-AKT蛋白表达水平,茜素红染色观察MSCs钙结节数量。结果 与模型组比较,2,4 mL·kg–1 IE组大鼠股骨骨密度、生物力学指标、血清生化指标均明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,4 mL·kg–1 IE组效果最佳。与对照组比较,10,20 mg·L–1 IE组MSCs增殖和成骨分化相关基因表达量明显升高(P<0.05或P<0.01),NCK1和p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05),MSCs内钙结节量明显增加,且呈剂量依赖性,20 mg·L–1 IE组效果最佳。与IE+NC siRNA组比较,IE+NCK1 siRNA组成骨分化相关基因表达量明显降低(P<0.01),NCK1和p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论 IE通过促进NCK1蛋白表达,激活AKT信号通路,对骨质疏松性大鼠骨折愈合起到一定促进作用。
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