【摘 要】
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采用PCR方法对来自大麦的LMW-GS16基因进行修饰,在基因5′及3′端分别加入构建表达载体所需的BamHI和SacI限制酶切位点,并将其连接在相应酶切的质粒pBI121上,构建成LMW-GS植
【机 构】
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四川农业大学小麦研究所,四川农业大学小麦研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，教育部长江学者和创新团队发展计划
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采用PCR方法对来自大麦的LMW-GS16基因进行修饰,在基因5′及3′端分别加入构建表达载体所需的BamHI和SacI限制酶切位点,并将其连接在相应酶切的质粒pBI121上,构建成LMW-GS植物表达载体pBI121-16.重组质粒转化到E.coli DH5α和农杆菌LBA4404中,通过Kanamycin筛选阳性克隆,用PCR方法进行鉴定.对照组转化率为零,转化组阳性克隆特异地扩增出900bp片段,与目标基因DNA大小一致,转化率为1.0×106/μgDNA.
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