【摘 要】
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目的 探讨重组耻垢分枝杆菌实验制剂(recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs)预防幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的作用机理.方法 实验制剂免疫BLAB/c小鼠4周,用
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆医科大学附属第一医院消化内科,重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆医科大学实验动物中心
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目的 探讨重组耻垢分枝杆菌实验制剂(recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs)预防幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的作用机理.方法 实验制剂免疫BLAB/c小鼠4周,用Hp攻击后4周,取血清、胃、脾组织,RT-PCR检测小鼠胃黏膜和脾组织的TH1型细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-12)与TH2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10);用ELISA检测针对Hp的特异性血清IgG、IgG1、IgG2a和IgA水平;用免疫组化方法检测胃黏膜固有层IgA表达;用MTF检测脾淋巴细胞增殖.结果 免疫后BALB/c小鼠特异性抗体显示rMs制剂诱导Hp特异性血清IgG、IgA水平都升高,以IgG2a占优势.用Hp抗原刺激后各免疫组小鼠脾淋巴细胞均有明显增殖.免疫组化显示各免疫组小鼠胃黏膜固有层IgA阳性标记腺体数明显高于对照组.RT-PCR证实,Hp攻击之前,各免疫组胃和脾组织已出现了IFN-γ、IL-12、IL-2表达而无IL-4、IL-6、IL-10表达.PBS对照组和单纯耻垢分枝杆菌(Ms)组胃黏膜和脾组织各细胞因子均无表达;Hp攻击后,PBS和单纯Ms组胃组织出现以TH1细胞IFN-γ为主的增生,IFN-γ水平显著高于rMs组(P＜0.05);而3个rMs制剂组脾脏则出现以TH2细胞(IL-4)为主的增生,IL-4水平显著高于对照组(P＜0.05).提示该制剂的作用机制是诱导TH1/TH2平衡型免疫应答.结论 成功地建立了BALB/c小鼠的Hp感染模型,对rMs制剂的免疫保护机理研究结果显示,rMs能产生以TH1细胞和TH2细胞协同作用的保护性免疫应答.
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