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摘要:以紫背天葵茎段为外植体,进行诱导、增殖、壮苗、生根培养、炼苗及移栽管理,总结紫背天葵种苗组培快繁技术。
关键词:紫背天葵;组织培养;快繁;种苗生产
DOI: 1013651/jcnkifjnykj201709010
Rapid propagation for Gynura bicolor seedlings by using tissue culture
ZHANG Shaoping, ZHANG Shuai, ZHENG Kaibin*, LIU Rongzhang, LIN Jiageng
(Subtropical Agriculture Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fujian Province 363005)
Abstract: With stem as the explants, the rapid propagation for Gynura bicolor seedlings through tissue culture was established, including the process of induction, proliferation, rooting, acclimatizing seedling and transplantation. In this study, the key points for the rapid propagation for Gynura bicolor seedlings were summarized.
Key words: Gynura bicolor; tissue culture; rapid propagation; seedling production
紫背天葵,又叫紫背菜、观音菜、红凤菜、血皮菜等[1],属菊科三七草属多年生草本宿根植物。紫背天葵作为蔬菜食用具有很高的营养及保健功效[2-3],但由于所含特殊气味导致其无法成为大宗蔬菜大面积种植。民间将紫背天葵作为特色蔬菜零星栽培于城郊房前屋后等地具有悠久的历史,由于栽种面积不大,传统种植紫背天葵常采用分株或扦插繁殖。近年来,天然花青素已引起广泛关注[4-5],富含花青素的紫背天葵除作为特色蔬菜食用外,还可作为观赏植物以及食用花青素的来源植物而广为种植[6]。
传统栽培采用分株或扦插繁殖具有一定的局限性,无法保证种苗的整齐一致,甚至易感染病毒病,对规模化生产种植紫背天葵带来极大不便,而且紫背天葵在南方很难采收到种子。而采用组培快繁技术具有繁殖速度快及繁殖系数大等优点。通过采用组培快繁技术,利用紫背天葵嫩枝材料就能在短期内生产出大量优质商品紫背天葵种苗,在不影响原有紫背天葵采收情况下获得较高的经济效益。本文从培养基配方、外植体材料选择处理、诱导增殖培养以及壮苗生根和移栽等方面总结紫背天葵快繁技术,为大量商品化生产紫背天葵优质组培苗提供服务。
1外植体材料获取
剪取长势良好、嫩度适中的紫背天葵枝条,去除叶片,剪成18 cm左右的茎段,在含有洗洁精300倍的溶液中浸泡5 min,流水冲洗8 min后转入超净工作台,用75%浓度的酒精消毒20 s,无菌水冲洗干净后再用01%升汞消毒6 min,无菌水冲洗3次,然后将消毒的紫背天葵茎段接种到培养基中。
2培养基配方选择
组培快繁紫背天葵不同阶段所需培养基均需加入3%蔗糖、6%琼脂,灭菌前用1 mol/L浓度的HCl或NaOH将培养基pH值调至58,培养基配好后搅拌均匀,依次装入洁净的玻璃瓶中,封口后于11 kg/cm2压力、121℃下灭菌15 min,自然冷却后备用。诱导培养基采用MS+BA 3 mg/L+NAA 02 mg/L,增殖培养基采用MS+BA 1 mg/L+NAA 01 mg/L,壮苗培养基采用MS+BA 02 mg/L+NAA 005 mg/L,生根培养基采用1/2MS+NAA 01 mg/L+活性炭05%。
3诱导培养
组培过程中,将消毒的紫背天葵茎段放到初代诱导培养基上进行培养,约7 d后茎段芽开始萌发。
4增殖培养
诱导培养15 d后将已长出的芽转接到增殖培养基上进行扩繁,扩繁后获得的新芽反复转接在新的增殖培养基上,不定芽通过不断转接、分割,使芽的数量不断增殖。
5壮苗培养
待紫背天葵芽增殖到预计的数量后,在保证一定数量增殖苗条件下,小于2 cm的不定芽继续转接在培养基上进行增殖培养;高于2 cm的不定芽单个切开,转入壮苗培养基培养30 d左右,再将产生的丛芽切开,生长纤细瘦弱的不定芽继续进行壮苗增殖培养。
6生根培养
张少平等:紫背天葵种苗组培快繁技术2017年第9期2017年第9期张少平等:紫背天葵种苗组培快繁技术将生长健壮旺盛的组培苗转入生根培养基进行生根培养。在2000 Lx左右光照条件下,约10 d后紫背天葵组培苗便开始长根,生根率可达100%。待幼小植株长有嫩叶2片或以上、苗高达3~5 cm时,将组培苗松盖放置2 d后再开盖3 d进行炼苗,接着从培养基上取出紫背天葵组培苗,用清水洗净根部琼脂糖后,密植于大棚富含砂壤土的苗床中,移植后浇透水,同时在移植组培苗的大棚内每畦加盖小拱棚,再盖上1层地膜以保证扦插苗所处环境达到足够的湿度。扦插1周内,每天早晚各浇1次水,小拱棚内溫度尽量保持在25℃左右,光照强度白天约3000 Lx。1周后揭开小拱棚地膜,此时管理可适当粗放,每天早或晚浇水1次,光照可适度增强(5000 Lx左右),1周后便可起苗移栽至大田。
7炼苗 待生根培养后的健壮组培苗长至3 cm时,依次通过松盖、开盖等过程进行炼苗,接着从瓶苗中取出并洗净培养基后,移栽至特殊环境下进行炼苗,经过适当时间炼苗后的紫背天葵种苗再移植至大田进行商品化种植。
8移栽
紫背天葵大田种植株行距一般为20 cm×25 cm,每畦种4行,每667 m2种植株数约8000株,作为蔬菜或天然花青素来源之用的,可待紫背天葵长至20 cm时采收,基部留约5 cm,随着采收次数的不断增加,根茎部不断变大。紫背天葵可以一次种植多年采收,但为保证商品化种植的产量和质量,种植1年左右就应换苗,有条件的可以换苗换地种植。
参考文献:
[1]张少平,赖正锋,吴水金,等药食同源植物紫背天葵研究现状与展望[J]中国农学通报,2014,30(4):58-61
[2]CHAO C Y,LIU W H,WU J J,et alPhytochemical profile,antioxidative and antiinflammatory potentials of Gynura bicolor DC[J]Journal of the Science of Food and Agriculture,2015,95(5):1088-1093
[3]MIYAZAWA M,NAKAHASHI H,USAMI A,et alChemical composition,aroma evaluation,and inhibitory activity towards acetylcholinesterase of essential oils from Gynura bicolor DC[J]J Nat Med,2016,70(2):282-289
[4]WU C C,Chang Y P,Wang J J,et alDietary administration of Gynura bicolor (RoxbWilld) DC water extract enhances immune response and survival rate against Vibrio alginolyticus and white spot syndrome virus in white shrimp Litopeneaus vannamei[J]Fish and Shellfish Immunology,2015,42(1):25-33
[5]WANG M,LIU H,DONG C,et alElevated CO2 enhances photosynthetic efficiency,ion uptake and antioxidant activity of Gynura bicolor DCgrown in a poroustube nutrient delivery system under simulated microgravity[J]Plant Biol,2016,18(3):391-399
[6]張少平,邱珊莲,邓源,等紫背天葵花青素相关研究与应用[J]中国农学通报,2015,31(22):157-162
(责任编辑:林玲娜)2017年第9期
关键词:紫背天葵;组织培养;快繁;种苗生产
DOI: 1013651/jcnkifjnykj201709010
Rapid propagation for Gynura bicolor seedlings by using tissue culture
ZHANG Shaoping, ZHANG Shuai, ZHENG Kaibin*, LIU Rongzhang, LIN Jiageng
(Subtropical Agriculture Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fujian Province 363005)
Abstract: With stem as the explants, the rapid propagation for Gynura bicolor seedlings through tissue culture was established, including the process of induction, proliferation, rooting, acclimatizing seedling and transplantation. In this study, the key points for the rapid propagation for Gynura bicolor seedlings were summarized.
Key words: Gynura bicolor; tissue culture; rapid propagation; seedling production
紫背天葵,又叫紫背菜、观音菜、红凤菜、血皮菜等[1],属菊科三七草属多年生草本宿根植物。紫背天葵作为蔬菜食用具有很高的营养及保健功效[2-3],但由于所含特殊气味导致其无法成为大宗蔬菜大面积种植。民间将紫背天葵作为特色蔬菜零星栽培于城郊房前屋后等地具有悠久的历史,由于栽种面积不大,传统种植紫背天葵常采用分株或扦插繁殖。近年来,天然花青素已引起广泛关注[4-5],富含花青素的紫背天葵除作为特色蔬菜食用外,还可作为观赏植物以及食用花青素的来源植物而广为种植[6]。
传统栽培采用分株或扦插繁殖具有一定的局限性,无法保证种苗的整齐一致,甚至易感染病毒病,对规模化生产种植紫背天葵带来极大不便,而且紫背天葵在南方很难采收到种子。而采用组培快繁技术具有繁殖速度快及繁殖系数大等优点。通过采用组培快繁技术,利用紫背天葵嫩枝材料就能在短期内生产出大量优质商品紫背天葵种苗,在不影响原有紫背天葵采收情况下获得较高的经济效益。本文从培养基配方、外植体材料选择处理、诱导增殖培养以及壮苗生根和移栽等方面总结紫背天葵快繁技术,为大量商品化生产紫背天葵优质组培苗提供服务。
1外植体材料获取
剪取长势良好、嫩度适中的紫背天葵枝条,去除叶片,剪成18 cm左右的茎段,在含有洗洁精300倍的溶液中浸泡5 min,流水冲洗8 min后转入超净工作台,用75%浓度的酒精消毒20 s,无菌水冲洗干净后再用01%升汞消毒6 min,无菌水冲洗3次,然后将消毒的紫背天葵茎段接种到培养基中。
2培养基配方选择
组培快繁紫背天葵不同阶段所需培养基均需加入3%蔗糖、6%琼脂,灭菌前用1 mol/L浓度的HCl或NaOH将培养基pH值调至58,培养基配好后搅拌均匀,依次装入洁净的玻璃瓶中,封口后于11 kg/cm2压力、121℃下灭菌15 min,自然冷却后备用。诱导培养基采用MS+BA 3 mg/L+NAA 02 mg/L,增殖培养基采用MS+BA 1 mg/L+NAA 01 mg/L,壮苗培养基采用MS+BA 02 mg/L+NAA 005 mg/L,生根培养基采用1/2MS+NAA 01 mg/L+活性炭05%。
3诱导培养
组培过程中,将消毒的紫背天葵茎段放到初代诱导培养基上进行培养,约7 d后茎段芽开始萌发。
4增殖培养
诱导培养15 d后将已长出的芽转接到增殖培养基上进行扩繁,扩繁后获得的新芽反复转接在新的增殖培养基上,不定芽通过不断转接、分割,使芽的数量不断增殖。
5壮苗培养
待紫背天葵芽增殖到预计的数量后,在保证一定数量增殖苗条件下,小于2 cm的不定芽继续转接在培养基上进行增殖培养;高于2 cm的不定芽单个切开,转入壮苗培养基培养30 d左右,再将产生的丛芽切开,生长纤细瘦弱的不定芽继续进行壮苗增殖培养。
6生根培养
张少平等:紫背天葵种苗组培快繁技术2017年第9期2017年第9期张少平等:紫背天葵种苗组培快繁技术将生长健壮旺盛的组培苗转入生根培养基进行生根培养。在2000 Lx左右光照条件下,约10 d后紫背天葵组培苗便开始长根,生根率可达100%。待幼小植株长有嫩叶2片或以上、苗高达3~5 cm时,将组培苗松盖放置2 d后再开盖3 d进行炼苗,接着从培养基上取出紫背天葵组培苗,用清水洗净根部琼脂糖后,密植于大棚富含砂壤土的苗床中,移植后浇透水,同时在移植组培苗的大棚内每畦加盖小拱棚,再盖上1层地膜以保证扦插苗所处环境达到足够的湿度。扦插1周内,每天早晚各浇1次水,小拱棚内溫度尽量保持在25℃左右,光照强度白天约3000 Lx。1周后揭开小拱棚地膜,此时管理可适当粗放,每天早或晚浇水1次,光照可适度增强(5000 Lx左右),1周后便可起苗移栽至大田。
7炼苗 待生根培养后的健壮组培苗长至3 cm时,依次通过松盖、开盖等过程进行炼苗,接着从瓶苗中取出并洗净培养基后,移栽至特殊环境下进行炼苗,经过适当时间炼苗后的紫背天葵种苗再移植至大田进行商品化种植。
8移栽
紫背天葵大田种植株行距一般为20 cm×25 cm,每畦种4行,每667 m2种植株数约8000株,作为蔬菜或天然花青素来源之用的,可待紫背天葵长至20 cm时采收,基部留约5 cm,随着采收次数的不断增加,根茎部不断变大。紫背天葵可以一次种植多年采收,但为保证商品化种植的产量和质量,种植1年左右就应换苗,有条件的可以换苗换地种植。
参考文献:
[1]张少平,赖正锋,吴水金,等药食同源植物紫背天葵研究现状与展望[J]中国农学通报,2014,30(4):58-61
[2]CHAO C Y,LIU W H,WU J J,et alPhytochemical profile,antioxidative and antiinflammatory potentials of Gynura bicolor DC[J]Journal of the Science of Food and Agriculture,2015,95(5):1088-1093
[3]MIYAZAWA M,NAKAHASHI H,USAMI A,et alChemical composition,aroma evaluation,and inhibitory activity towards acetylcholinesterase of essential oils from Gynura bicolor DC[J]J Nat Med,2016,70(2):282-289
[4]WU C C,Chang Y P,Wang J J,et alDietary administration of Gynura bicolor (RoxbWilld) DC water extract enhances immune response and survival rate against Vibrio alginolyticus and white spot syndrome virus in white shrimp Litopeneaus vannamei[J]Fish and Shellfish Immunology,2015,42(1):25-33
[5]WANG M,LIU H,DONG C,et alElevated CO2 enhances photosynthetic efficiency,ion uptake and antioxidant activity of Gynura bicolor DCgrown in a poroustube nutrient delivery system under simulated microgravity[J]Plant Biol,2016,18(3):391-399
[6]張少平,邱珊莲,邓源,等紫背天葵花青素相关研究与应用[J]中国农学通报,2015,31(22):157-162
(责任编辑:林玲娜)2017年第9期