强力霉素诱导表达脑啡肽细胞株的构建及其对慢性神经痛大鼠的镇痛作用

来源 :解剖学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhyyxz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的构建受强力霉素诱导表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株,并评价鞘内移植该细胞对慢性坐骨神经压榨性损伤(CCI)大鼠的镇痛效应。方法应用逆转录病毒转染法,建立受强力霉素调控表达人前脑啡肽原基因(hPPE)的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/Tet-On/hPPE),实时定量PCR及放射免疫分析法检测强力霉素对该细胞株脑啡肽表达的定量调节。将IAST/Tet-On/hPPE细胞植入CCI大鼠蛛网膜下腔,观察腹腔注射强力霉素对其镇痛效应的影响及免疫组织化学检测脊髓背角Fos蛋白的表达。结果实时定量PCR及放射免疫分析结果显示,强力霉素可定量调控IAST/Tet-On/hPPE细胞株中脑啡肽的表达;IAST/Tet-On/hPPE植入CCI大鼠的蛛网膜下腔后,大鼠机械缩爪阈值升高(P<0.05),脊髓背角浅层Fos蛋白表达明显降低(P<0.05),且该镇痛效应受强力霉素调控。结论成功构建了可调控的定量表达脑啡肽的永生化星形胶质细胞株,其有望成为慢性疼痛治疗的新方法。 Objective To construct an immortalized rat astrocyte cell line induced by doxycycline and to evaluate the analgesic effect of intrathecal transplantation of the cells on chronic constriction injury (CCI) in rats. Methods The retroviral transfection method was used to establish the immortalized rat astrocyte line (IAST / Tet-On / hPPE) regulated by doxycycline (hPPE) Radioimmunoassay was used to detect the quantitative regulation of enkephalin expression in this cell line. IAST / Tet-On / hPPE cells were implanted into the subarachnoid space of CCI rats to observe the effect of intraperitoneal injection of doxycycline on the analgesic effect and the expression of Fos protein in spinal dorsal horn by immunohistochemistry. Results Real-time quantitative PCR and radioimmunoassay results showed that doxycycline could quantitatively regulate the expression of enkephalin in IAST / Tet-On / hPPE cell lines. IAST / Tet-On / hPPE was implanted into the subarachnoid space of CCI rats (P <0.05). The expression of Fos protein in the spinal dorsal horn was significantly decreased (P <0.05), and the analgesic effect was controlled by doxycycline. Conclusion An immortalized astrocyte cell line that can regulate the expression of enkephalin was successfully constructed, which is expected to become a new method for the treatment of chronic pain.
其他文献
由于营销活动受到内外环境各个层面因素的影响,因此就存在许多不确定的风险.为了减少或规避各种营销风险对企业经营的不利影响,本文针对企业在营销活中面临的主要风险进行了
路线线形设计是指公路平面线形、纵面线形及其二者相结合的三维空间线形的总称.路线的选定和线形设计不到位,将造成驾驶员行车时在视觉上的错误判断和心理上的不良反应,容易
工地试验检测是公路工程质量控制重要部分,试验检测工作严谨有效的运行,才能保证其工作成果为工程质量控制提供准确依据及指导.本文就如何加强工地试验检测管理,有效控制工程
Bax是哺乳动物细胞凋亡基因Bcl-2家族中的一员.以往的研究报道表明,Bax基因可以诱发拟南芥等模式植物的超敏反应(hypersensitive reactions,HR).为了考查Bax基因对药用植物细
随着我国新农村建设的逐步推进,农村公路建设也取得了很好的成绩,推动了农村经济的发展.但随之而来的各类车混行现象越来越严重,使得交通事故发生率呈增长趋势.本文针对我国
EST是携带有表达基因部分遗传信息的cDNA片段,EST聚类是将来自同一个基因的具有重叠部分的EST整合到单一的类中,是进行后续基因表达数据分析的必要步骤。传统的串行聚类方法
对10头原种婆罗门牛mtDNA D-loop全序列912 bp测序, 婆罗门牛遗传多样性丰富, 检测到的9种单倍型兼有瘤牛(B. indicus)与普通牛(B. taurus)的遗传背景, 核苷酸变异率为6.25%,
近年来,公路工程得到了快速发展,其中施工技术是关键,本文主要就公路施工新技术新工艺及其应用进行了分析研究.
农村公路是公益性最强的公共基础设施,属于典型的公共物品,是农村生产生活、农村经济社会发展的基础."要想富,先修路"、"公路通,百业兴"等谚语已经成为农村公路在农村经济社
作为公路建设中一项较为重要的环节,公路施工管理是把施工图纸变为实际的重点步骤之一.为达到公路建设的预期目标,必须控制好公路施工质量.所以,在开展公路施工管理工作时,必