【摘 要】
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目的:研究雷公藤红素靶向调节NOX4后抑制肿瘤相关成纤维细胞形成的作用和机制.方法:小鼠成纤维细胞NIH3T3和肝癌H22共培养,将细胞分为对照组及雷公藤红素(5、10、20μmol/L)组.CCK-8法检测成纤维细胞的活力,PI染色后流式细胞术检测细胞周期的改变,免疫荧光染色检测CAFs标志物α-SMA、FAP的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测CAFs标志物α-SMA、FAP的表达水平以及NOX4、TGF-β1、Smad1的表达.H22构建荷瘤小鼠模型后,用雷公藤红素进行处理,免疫组
【机 构】
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嘉兴市第二医院,浙江 嘉兴314001
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目的:研究雷公藤红素靶向调节NOX4后抑制肿瘤相关成纤维细胞形成的作用和机制.方法:小鼠成纤维细胞NIH3T3和肝癌H22共培养,将细胞分为对照组及雷公藤红素(5、10、20μmol/L)组.CCK-8法检测成纤维细胞的活力,PI染色后流式细胞术检测细胞周期的改变,免疫荧光染色检测CAFs标志物α-SMA、FAP的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测CAFs标志物α-SMA、FAP的表达水平以及NOX4、TGF-β1、Smad1的表达.H22构建荷瘤小鼠模型后,用雷公藤红素进行处理,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中α-SMA的表达情况及CAFs标志物的表达水平.结果:雷公藤红素预处理后可抑制与H22细胞共培的NIH3T3的增殖,提高G0/G1期细胞比例,降低G2、S/M期细胞比例,并下调CAFs标志物α-SMA、FAP的表达,抑制NOX4和TGF-β信号.而在H22荷瘤小鼠模型中,雷公藤红素也可显著抑制α-SMA FAP、NOX4、TGF-β1、Smad1蛋白表达.结论:雷公藤红素可通过NOX4信号抑制肝癌相关成纤维细胞的转化,这是雷公藤红素抗肿瘤的作用机制之一.
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