【摘 要】
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目的 探讨在香烟烟雾提取物(cigarette smoking extract,CSE)作用下人支气管上皮细胞(NHBE)中内质网应激对线粒体融合功能的影响.方法 体外培养NHBE,用CCK8法检测CSE不同浓度
【机 构】
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中南大学湘雅医院呼吸内科, 长沙,410008
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目的 探讨在香烟烟雾提取物(cigarette smoking extract,CSE)作用下人支气管上皮细胞(NHBE)中内质网应激对线粒体融合功能的影响.方法 体外培养NHBE,用CCK8法检测CSE不同浓度及不同时间干预对细胞存活率的影响,确定CSE干预的最佳浓度及时间.实验分为4组:对照组,内质网应激抑制剂(4-PBA)组,CSE干预组,4-PBA+ CSE组,并分别给予相应浓度CSE及4-PBA干预.qPCR及Western blot法检测内质网应激特异性蛋白CHOP及线粒体融合蛋白2(MFN2)的表达.结果 细胞的生存率随CSE干预浓度及时间的增加而下降,CSE最佳干预浓度为5％,时间为12 h.与正常对照组比较,CSE干预组CHOP表达增加,MFN2表达下降,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为4.17,0.67;蛋白水平上均？差分别为3.38,1.26;P值均＜0.05];4-PBA+ CSE组与CSE干预组比较,CHOP表达下降,MFN2表达增加,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为2.47,0.41;蛋白水平上均值差分别为1.90,0.85,P值均＜0.05].结论 CSE作用下NHBE发生内质网应激,内质网应激通过减少MFN2影响线粒体融合.
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