【摘 要】
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将人促红细胞生成素(hEPO)、人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)、细胞程序死亡抑制基因(BCL-2)重组逆转录病毒质粒DNA转染病毒包装细胞PA317后,经G418抗性筛选,其单克隆细胞株培养上清液均具有感染NIH3T3及大鼠原代成纤维细
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将人促红细胞生成素(hEPO)、人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)、细胞程序死亡抑制基因(BCL-2)重组逆转录病毒质粒DNA转染病毒包装细胞PA317后,经G418抗性筛选,其单克隆细胞株培养上清液均具有感染NIH3T3及大鼠原代成纤维细胞、成肌细胞并形成G418抗性克隆的能力。其感染细胞的染色体DNAPCR鉴定结果均为阳性,表明其染色体中均成功地整合了目的基因;感染的靶细胞均能表达外源基因编码蛋白,表明已成功地建立了逆转录病毒介导的基因转移技术。
After transfection of human recombinant erythropoietin (hEPO), human granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF), and programmed cell death suppressor (BCL-2) recombinant retrovirus plasmid DNA into PA317 cells, Screening, the monoclonal cell line culture supernatants are infected NIH3T3 and rat primary fibroblasts, myoblasts and the ability to form G418 resistant clones. The results of PCR showed that all the infected cells had positive PCR results, indicating that the target gene was successfully integrated into the chromosomes of the infected cells. The infected target cells could express the exogenous gene coding protein, indicating that the retrovirus-mediated gene was successfully established Transfer technology.
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