【摘 要】
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目的 寻找周围神经感觉和运动束之间的特异蛋白,为周围神经功能束的鉴别提供标志蛋白。方法 分别对Wistar大鼠股神经运动支和隐神经正常状态、在Sunderland V损伤后8 h和8 d时间点取材,断端远侧各切取5 mm样本,6种样本共18组分离提取蛋白,纯化及定量后应用差异凝胶电泳技术(DIGE)荧光标记蛋白质,凝胶图像扫描,用图像分析软件(DeCyder)比较分析并识别各组间的差异表达蛋白质图
【基金项目】
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教育部春晖计划项目(Z2010040);
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目的 寻找周围神经感觉和运动束之间的特异蛋白,为周围神经功能束的鉴别提供标志蛋白。方法 分别对Wistar大鼠股神经运动支和隐神经正常状态、在Sunderland V损伤后8 h和8 d时间点取材,断端远侧各切取5 mm样本,6种样本共18组分离提取蛋白,纯化及定量后应用差异凝胶电泳技术(DIGE)荧光标记蛋白质,凝胶图像扫描,用图像分析软件(DeCyder)比较分析并识别各组间的差异表达蛋白质图谱,选择表达差异大于1.5倍的蛋白点,制备胶上切割、酶切、点靶,MALDI-TOF-Pro质谱仪进行PMF图谱分析鉴定,应用Rt-PCR技术分析验证蛋白质组学研究的结果。结果 Annexin V、NF-L、Tec、Serpina3n、PRDX-2、TPM1等6个蛋白点被确切地鉴定。Annexin V在股神经运动支/隐神经的比值是-1.94倍,匹配良好,蛋白稳定出现在所有胶中,P(0.00068)<0.05,具有统计学意义;在Sunderland V损伤后8 h的股神经运动支/隐神经的比值是-2.07倍,匹配良好,蛋白稳定出现在所有胶中,P(0.0053)<0.05,具有统计学意义;在Sunderland V损伤后8 h的股神经运动支/隐神经的比值是-2.20倍,匹配良好,蛋白稳定出现在所有胶中,P(0.0069)<0.05,具有统计学意义。结论 周围神经感觉束和运动束之间的比较蛋白质组学表达存在明显差异,Annexin V可作为鉴别周围神经感觉和运动束的高差异标记蛋白。
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