【摘 要】
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目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克
【机 构】
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广东省东莞市妇幼保健院产前诊断中心 东莞 523001;北京大学深圳医院男性生殖医学实验室
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目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中,将载体以脂质体方式转染至TM4细胞,通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株,以RT-PCR和Western-blot检测AR在转染前后TM4细胞中的表达情况.结果 成功构建了pcDNA3.1(-)/AR表达质粒,建立了稳定转染的TM4细胞系.RT-PCR和Western-blot检测结果表明,AR基因在该细胞系中成功表达.结论 AR真核表达载体成功构建和稳定转染TM4细胞系的建立为进一步体外研究AR的功能奠定了基础.
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