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于1997年6月在青岛市沙子口海域采集文昌鱼样品,采用RT-PCR方法进行青岛文昌鱼LIM类同源框基因片段的扩增研究。结果表明,用一对 引物一次PCR扩增的方法未能得到特异的PCR产物,用一对引物两次PCR扩增的方法也同样未 果。在对套式PCR进行研究时发现,用普遍PCR方法进行的套式PCR结果不够理想,而用三步 两段法和四步两段法套式PCR则可进行成功的扩增。用这两种方法扩增的PCR产物具有高度特 异 性。相比之下,用简并的引物对未知的基因片段进行PCR扩增时,三步两段法和四步两段法 的套式PCR应是首