分析慢性乙型肝炎患者外周血中IL-10+CD19+调节性B淋巴细胞(Breg)的表达及其免疫调节机制。
方法病例对照研究。收集2011年6月—2012年10月常熟市第二人民医院住院患者,急性乙型肝炎(AHB)患者28例,慢性乙型肝炎(CHB)患者31例和健康对照25名。分离外周血单个核细胞(PBMC),经含CpG序列的寡脱氧核苷酸CpG ODN 2006和佛波醇酯(PMA)体外作用后,流式细胞术分析IL-10+CD19+ Breg、CD4+CD25high调节性T淋巴细胞(Treg)的表达及其相关性,ELISA分析培养上清IL-10水平。Mann-Whitney U检验分析两组间差异,Spearman相关分析两组连续变量间的相关性。
结果CHB组外周血Breg[1.28%(1.05%~2.20%)]高于AHB组[0.87%(0.55%~1.22%)]和HCs组[0.89%(0.51%~1.37%)](P值分别为0.001和0.006),AHB和HCs组间差异无统计学意义(P=0.669)。CpG ODN 2006和PMA作用后CHB组Breg[14.30%(10.70%~16.70%)]较AHB组[10.30%(7.05%~13.30%)]和HCs组[10.40%(6.85%~12.60%)]显著升高(P值分别为0.003和0.001);CHB组Treg[5.80%(4.20%~9.10%)]较AHB组[4.05%(2.53%~5.40%)]和HCs组[4.50%(2.55%~5.50%)]也显著增高(P值分别为<0.001和0.005)。AHB和HCs组间差异均无统计学意义(Breg:P=0.796;Treg:P=0.227)。Spearman相关性分析发现CHB组Breg与Treg存在正相关关系(r=0.50,P=0.004),而AHB和HCs组无此相关性(r=-0.15,P=0.462;r=0.09,P=0.669)。CHB组IL-10表达高于AHB和HCs组(P<0.001)。AHB和HCs组间差异无统计学意义(P=0.341),Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系(r=0.409,P=0.005)。
结论B淋巴细胞Breg和调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中表达升高,Breg可能通过IL-10的分泌在HBV慢性感染过程中发挥免疫调节作用。(中华检验医学杂志,2014,37:100-104)