人防御素6基因的克隆、亚克隆及在酵母中的分泌表达

来源 :微生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sz_ydz

【摘要】

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探讨人防御素6（HD-6）在毕赤酵母中表达的可行性，为进一步研究HD6的功能提供理论依据和实验基础。采用PCR方法，设计引物从cDNA文库中扩增出人α防御素6基因片段，并将其插入到克隆载

【作者】

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单颖吴学敏卢颖

【机构】

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辽宁医学院免疫学教研室

【出处】

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微生物学杂志

【发表日期】

：

2014年3期

【关键词】

：

人防御素6 表达质粒毕赤酵母 human defensin 6 （HD-6） expression plasmid Pichia pastoris

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探讨人防御素6（HD-6）在毕赤酵母中表达的可行性，为进一步研究HD6的功能提供理论依据和实验基础。采用PCR方法，设计引物从cDNA文库中扩增出人α防御素6基因片段，并将其插入到克隆载体pMD-18T中，再与毕赤酵母表达载体pPICZαA重组，以得到重组的HD-6酵母表达载体pPICZαA/HD-6，并进行琼脂糖电泳和测序鉴定。再将构建好的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA/HD-6经SacⅠ线性化后，应用LiCl法转化毕赤酵母菌株GS115感受态中，Zeocin平板筛选，PCR鉴定转化子。经摇瓶发酵和

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