【摘 要】
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目的 构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-N1-ST3Gal Ⅰ真核表达载体,分析其在人乳腺癌细胞系MCF-7中的表达,筛选稳转细胞株,为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3唾液酸与
【机 构】
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黑龙江省齐齐哈尔医学院药物研究所,黑龙江中医药大学
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目的 构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-N1-ST3Gal Ⅰ真核表达载体,分析其在人乳腺癌细胞系MCF-7中的表达,筛选稳转细胞株,为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3唾液酸与转移潜能调控提供细胞模型.方法 采用RT-PCR扩增ST3Gal Ⅰ全长基因片段,克隆至pEGFP-N1载体进行测序分析,用脂质体将重组真核表达载体pEGFP-N1-ST3Gal Ⅰ转染人乳腺癌细胞MCF-7中,经荧光显微镜观察及RT-PCR检测hST3Gal I的表达,G418抗性筛选稳转细胞株.结果 成功构建了真核表
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