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本文首次报道了EHFV在Vero细胞上的半微量悬浮接种空斑形成技术,该技术以不同稀释度病毒液直接种入刚消化的Vero细胞悬液中,孵育形成细胞单层后加细胞覆盖物,继续培养7天加第二层染色,9~10天即可数斑。
7株经Vero细胞传代的EHFV都能形成空斑,形成的空斑能被抗EHFV免疫血清中和抑制,敏感性与E6细胞的半微量空斑法和免疫荧光TCID50法基本一致。Vero细胞生命力强,易于传代繁殖和形成单层,因此,用Vero细胞建立的半微量悬浮接种空斑法具有细胞来源方便、细胞维持时间较长、空斑实验过程缩短和操作易于掌握等优点,可以代替E6细胞的半微量空斑法。