【摘 要】
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目的 研究视蛋白3在正常人真皮成纤维细胞中对I型胶原蛋白生成的影响及其可能的机制。方法 取小儿包皮真皮成纤维细胞分离、培养、传代，至3～5代，用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1～5的表达，细胞免疫荧光检测视蛋白3及I型胶原蛋白表达及定位。设计针对人视蛋白3的小干扰RNA，利用脂质体转染入正常人真皮成纤维细胞，分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。成功下调视蛋白3后，用
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81972920）； 贵州省自然科学基金（黔科合基础-ZK[2022]一般449，黔科合基础-ZK[2022]一般413）；
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目的 研究视蛋白3在正常人真皮成纤维细胞中对I型胶原蛋白生成的影响及其可能的机制。方法 取小儿包皮真皮成纤维细胞分离、培养、传代，至3～5代，用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1～5的表达，细胞免疫荧光检测视蛋白3及I型胶原蛋白表达及定位。设计针对人视蛋白3的小干扰RNA，利用脂质体转染入正常人真皮成纤维细胞，分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。成功下调视蛋白3后，用荧光定量PCR、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定及细胞免疫荧光检测I型胶原蛋白表达变化；通过CCK-8及EDU检测细胞增殖活力，流式细胞仪检测细胞周期，Transwell检测细胞迁移能力；通过蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT及磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的表达情况。最后抑制通道蛋白AKT的磷酸化，通过蛋白免疫印迹法检测I型胶原蛋白表达变化。结果 视蛋白1～5均在正常人真皮成纤维细胞中表达，其中视蛋白3基因及蛋白表达水平较其他视蛋白表达高，差异有统计学意义（P ＜0.05）。下调正常人真皮成纤维细胞中视蛋白3后，细胞合成及分泌I型胶原蛋白水平降低，差异有统计学意义（P ＜0.05）；细胞增殖、迁移能力减弱，差异有统计学意义（P ＜0.05）；细胞周期中S期比例明显降低，差异有统计学意义（P ＜0.05）；磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的蛋白表达水平被明显抑制；抑制通路蛋白AKT的活化后，细胞合成I型胶原蛋白水平降低。结论 视蛋白3参与调控正常人真皮成纤维细胞中I型胶原蛋白的合成，可能是创伤愈合、纤维化相关疾病及医疗美容潜在的治疗靶点。
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