【摘 要】
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目的 探究Chemerin对恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞RF/6A血管形成的影响及其可能作用机制.方法 RF/6A细胞随机分为3组,其中CO组:正常培养RF/6A细胞24 h;CH组:RF/6A细胞与10μg·L-1 Chemerin混合培养24 h;CN组:在CH组基础上+200μmol·L-1 N-乙酰半胱氨酸混合培养24 h.通过荧光探针-二氢乙啶(DHE)法、MTT法、细胞划痕实验、基质胶(Matrigel)法、Western blot等检测CO组、CH组、CN组RF/6A细胞活性氧(ROS)表达
【机 构】
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476100 河南省商丘市,河南省商丘市第一人民医院眼科;476100 河南省商丘市,商丘医学高等专科学校基础医学部
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目的 探究Chemerin对恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞RF/6A血管形成的影响及其可能作用机制.方法 RF/6A细胞随机分为3组,其中CO组:正常培养RF/6A细胞24 h;CH组:RF/6A细胞与10μg·L-1 Chemerin混合培养24 h;CN组:在CH组基础上+200μmol·L-1 N-乙酰半胱氨酸混合培养24 h.通过荧光探针-二氢乙啶(DHE)法、MTT法、细胞划痕实验、基质胶(Matrigel)法、Western blot等检测CO组、CH组、CN组RF/6A细胞活性氧(ROS)表达水平、增殖情况、迁移能力、管腔形成、p38MAPK蛋白表达的差异.结果 CH组RF/6A细胞中ROS表达水平、细胞增殖数量均显著高于CO组、CH组(均为P<0.05).CO组、CH组、CN组RF/6A细胞迁移面积(像素)分别为31268±1397、56489±2653、39684±1864,细胞管腔形成数量分别为(1.06±1.12)个、(6.04±2.24)个、(3.08±3.67)个,3组间细胞迁移面积、管腔形成数量比较差异均有统计学意义(均为P<0.05).Western blot检测结果显示,CH组RF/6A细胞中p38MAPK蛋白相对表达量显著高于CO组、CN组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 Chemerin对RF/6A细胞血管形成有促进作用,其机制与ROS介导的MAPK通路激活有关.
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