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双亚型（H5/H7）流感病毒血凝素基因真核表达质粒的构建及其在BHK细胞中的表达

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：idlerman

【摘 要】

：

目的构建双亚型（H5/H7）流感病毒血凝素真核表达载体,并在幼仓鼠（BHK）细胞中进行表达。方法通过PCR方法分别改造流感病毒H5亚型血凝素（HA）和H7亚型HA基因片段,在融合片段间引入具有

【作 者】

：

白靓 金宁一 成岩 石毅 王芳 鲁会军 南文龙 关铭 

【机 构】

：

吉林大学药学院,军事医学科学院11所全军基因工程重点实验室

【出 处】

：

中国老年学杂志

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

流感病毒 血凝素 真核表达 BHK细胞 

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目的构建双亚型（H5/H7）流感病毒血凝素真核表达载体,并在幼仓鼠（BHK）细胞中进行表达。方法通过PCR方法分别改造流感病毒H5亚型血凝素（HA）和H7亚型HA基因片段,在融合片段间引入具有柔性功能的（G4S）3linker和具有自裂解功能的口蹄疫蛋白2A linker。将融合后的基因片段H5HA-H7HA克隆至真核表达载体pVAX1。选用BHK真核表达细胞系,用脂质体转染法将纯化后的表达质粒在细胞进行表达,转染后48h,用间接免疫荧光法（IFA）检测目的基因的表达情况。结果表达双亚型（H5/H7）流感

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