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目的:构建妊娠中肾细胞因子(Midkine,MK)的原核表达载体并诱导其表达.方法:利用RT-PCR技术从人胎儿肾组织总RNA扩增MK成熟肽的DNA的编码序列,将扩增产物插入至温控表达载体pBV220中并转化E.coli DH 5α温度诱导表达.结果:琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度与目的片段相符.对重组质粒分析表明,插入片段的序列与Gene Bank发表的人MK基因编码序列一致.SDS-PAGE电泳显示,重组菌高效表达出一个相对分子质量约为13×103的蛋白产物.结论:人MK编码序列已被克隆至