Western-blot检测蛋白表达的方法改进及初步应用

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目的探讨Western-blotting-增强化学发光法(ECL)在分析细胞周期调控蛋白表达中的应用.方法采用K562细胞,制备细胞核,对电泳、封闭、结合、检测等关键步骤进行了实验条件的摸索和改进,并对我室研究苦参碱诱导K562细胞分化机制的细胞周期蛋白的表达进行了分析.结果 30μg核蛋白质即可检测到K562细胞中,均有不同程度的CyclinE、Cdlk2、CyclinD1、Cdk5表达.结论Western-blotting-ECL法特异性强、灵敏度高,是分析蛋白质表达较为理想的方法.
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