【摘 要】
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目的探讨临床新检出的对碳青霉烯类药物耐药、头孢他啶(CAZ)和/或头孢吡肟(FEP)不耐药的铜绿假单胞菌耐药机制。方法琼脂稀释法测定5种抗菌药物对铜绿假单胞菌的MIC。改良三
【机 构】
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江苏大学基础医学与医学技术学院,南京军区南京总医院临床中心实验科
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目的探讨临床新检出的对碳青霉烯类药物耐药、头孢他啶(CAZ)和/或头孢吡肟(FEP)不耐药的铜绿假单胞菌耐药机制。方法琼脂稀释法测定5种抗菌药物对铜绿假单胞菌的MIC。改良三维试验检测细菌耐药酶的产生。SDS-PAGE观察对亚胺培南(IPM)耐药的铜绿假单胞菌分子量(Mr)46 000外膜蛋白OprD的改变。PCR扩增oprD基因并进行序列分析。结果 29株分离菌对IPM均为中、低度耐药,对CAZ为敏感或者中介(除46号菌外)。改良三维试验显示29株细菌均未产碳青霉烯酶。SDS-PAGE显示外膜蛋白缺失可分为3种类型:7株为外膜蛋白整体缺失或者减少,4株外膜蛋白无明显变化,其他均为Mr 46 000外膜蛋白缺失或者减少。按3种缺失类型选择了12株菌测序,发现:其中1株不同位置有多个点突变,导致出现终止密码子;7株出现碱基的少量缺失;3株有新碱基插入;1株为大片段的碱基置换。结论由编码外膜蛋白的oprD基因缺失、突变以及插入导致的外膜蛋白缺失或改变是引起该表型铜绿假单胞菌对碳青酶烯类药物耐药的主要原因。
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