D-甘露糖异构酶在大肠杆菌中的表达及催化条件的研究

来源 :北京化工大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:raulhm
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根据已知的放射性土壤杆菌体内的D-甘露糖异构酶(Fmi)氨基酸序列,设计适合在大肠杆菌内表达的Fmi基因序列(1245bp),采用体外基因拼接合成。构建了表达Fmi的重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET30-Fmi,诱导表达的Fmi蛋白经SDS—PAGE验证为可溶性蛋白,分子量44000。通过实验优化了Fmi的催化条件,结果表明Fmi催化的最适pH值为7.5,最适温度为45℃,催化1h酶活达5.29U/mL。以25%的果糖溶液为底物时,催化2h果糖转化率达29.4%。
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