人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白真核表达载体的构建和鉴定

来源 :国际检验医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiahenglipin

【摘要】

：

目的构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达。方法从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重

【作者】

：

何莹罗阳王英翔陈安胡川闽

【机构】

：

中国人民解放军第323医院检验科,第三军医大学临床生化教研室,第三军医大学西南医院检验科,中国人民解放军66284部队

【出处】

：

国际检验医学杂志

【发表日期】

：

2013年13期

【关键词】

：

中性白细胞载脂蛋白类明胶酶类逆转录聚合酶链反应重组遗传 neutrophils apolipoproteins gelatinases reverse

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目的构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达。方法从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/His A-NGAL,经测序鉴定正确后用脂质体转染HEK293T细胞,用Western blot和ELISA方法鉴定表达产物。结果获得长度597bp的NGAL蛋白基因并构建pcDNA3.1/His A-NGAL真核表达载体,测序正确后转染,用Western blot和ELISA方法证

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