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运用现代生物学技术，对米曲霉40214菌株发酵产中性蛋白酶的培养基组分及培养条件进行优化，旨在提高菌株产中性蛋白酶的产量。通过单因素实验和正交实验确定了发酵培养基的最佳组分，添加葡萄糖8.0%，酵母粉4.0%， Na2HPO40.10%；最适发酵条件为发酵温度28℃，初始pH值6.5，发酵时间96 h，加水量60.0%，经过优化后酶活性提高了1.75倍，达到2845.68 U/mL，实验为进一步提高米曲霉40214菌株产中性蛋白酶的能力并将其应用到食品发酵中奠定了理论基础。