变形链球菌表面蛋白pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP真核表达质粒的构建

来源 :华西口腔医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mingming7978
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目的:构建变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP,即表面蛋白氨基端与中央区T、B细胞表位的两个基因疫苗。方法:通过PCR扩增,获得分别编码变形链球菌表面蛋白PAc氨基端和中央区T、B细胞表位的两个目的基因pac-A和pac-P。将它们与真核穿梭表达载体pcDNA3进行体外重组,并转化大肠杆菌XL1-Blue,采用菌落原位杂交筛选出阳性克隆子后,抽提重组质粒,进行酶切鉴定、Southem杂交分析和DNA序列测定。结果:真核表达质粒pcDNA3/pacA与pcDNA3/p
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