高速离心—同位素示踪法分析核糖体—mRNA复合物

来源 :中国农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvlianpeng2009
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本实验全面改进了用于蛋白质起始翻译阶段研究的传统介质梯度离心法.以32P-(TMV-RNA)为供试mRNA在麦胚离体翻译系统中形成核糖体-mRNA复合物,在100 μL蔗糖垫上(含蔗糖、Hepes、KAC、Mg(AC)2和肝素钠,pH7.5),1.5×104 r*min-1离心150 min即可分离该复合物与游离mRNA.测定沉淀物的cpm值可对其定性定量分析.该方法简便快速、准确安全、成本低.
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