探讨两种常用的蛋白水解酶（Glu-C和Lys-C）在质谱法测定糖化血红蛋白（HbA1C）中的差异性研究。
方法病例对照研究。收集2012年2至4月北京朝阳医院门诊和住院患者剩余血液合计200 ml，患者来源中男90例，女70例，年龄20~60岁，平均年龄（44±16）岁。依据国际临床化学协会（IFCC）推荐的基于质谱法的HbA1C参考测量方法处理收集的血液样本（样本编号为：201201、201202、201203），分别应用两种常用的蛋白水解酶（Glu-C和Lys-C）酶解样本中的血红蛋白，使用固相萃取的方法进行质谱前处理，设定最适实验条件后，应用液相色谱串联质谱测定样本中HbA1C的含量。使用Sequest软件对制备的实验样本进行血红蛋白变异体的筛查，所有由液相色谱串联质谱获得的质谱结果都需使用Sequest软件针对人类国际蛋白指数（IPI）数据库搜索RAW文件，检索结果与血红蛋白变异体网站上公布的4种常见的血红蛋白变异体（HbS、HbC、HbD、HbE）进行比对。采用SPSS 13.0统计软件和Excel 2003对测量结果进行相关性分析，组间比较采用独立样本t检验。
结果经液相色谱串联质谱检测结果可知，在检测HbA1C浓度时，分别用Glu-C和Lys-C酶解血液样本201201、201202、201203，其中经Lys-C酶解的样本HbA1C检测结果分别为（34.70±2.80）、（51.76±1.60）、（73.39±1.11）mmol/mol，经Glu-C酶解的样本糖化血红蛋白检测结果分别为（33.12±1.48）、（54.54±2.50）、（75.40±3.60）mmol/mol，组间比较差异无统计学意义，两种方法测定结果绘制相关曲线，R2均>0.995。经Sequest进行人类数据库检索，未筛查出4种常见的血红蛋白变异体的存在。
结论在质谱法检测HbA1C时，应用上述两种常用的蛋白水解酶酶解血液样本时，可以得到较为一致的结果，两种方法检测结果相关性良好。（中华检验医学杂志,2013,36:733-737）