【摘 要】
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目的:探讨心肌干细胞(CSC)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSC培养的方法。方法:用不同的消化方法来分C57BL小鼠心脏组织中的细胞,将获得的细胞置于自
【机 构】
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南京中医药大学第一临床医学院,南京大学医学院附属鼓楼医院心血管科,
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目的:探讨心肌干细胞(CSC)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSC培养的方法。方法:用不同的消化方法来分C57BL小鼠心脏组织中的细胞,将获得的细胞置于自行拟定的心肌干细胞培养液中培养。以c-kit、Sca-1和Sca-1/c-kit作为干细胞标记,用免疫磁珠法纯化细胞。用流式细胞仪、免疫荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测分选后所得细胞表面标记表达,并对比观察分选前后细胞生长情况,进一步了解CSC的生物学特性。结果:①从小鼠心肌组织中分离培养所得的细胞中,含有一种类似于文献报道中所提及CSC形态的细胞。②用免疫磁珠法可以分选出高纯度的CSC,实验中分选出CSC分别具有c-kit+-CD34--lin-、Sca-1+-CD34low-Lin-、Sca-1+-c-kit+-CD34low-Lin-的表型。③分选后的干细胞经过1～2d的滞留期后,贴壁生长的细胞形态相对均一;而传代后细胞贴壁迅速,细胞形态多样。结论:从C57BL小鼠心脏中可以分离、培养获得CSC,并可用免疫磁珠法得以纯化。
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