大肠杆菌O157：H7候选效应蛋白Z1370的原核表达、纯化及多抗制备

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：alabo353

【摘要】

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为鉴定肠出血性大肠杆菌O157：H7的效应蛋白，本研究利用生物信息学方法预测了1个新的大肠杆菌O157：H7分泌蛋白Z1370，并以EDL933菌株为模板，扩增Z1370基因。将该基因克隆至原核表达

【作者】

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王豪举闫青毛旭虎丁红雷

【机构】

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西南大学动物科技学院,中国农业大学动物医学院,第三军医大学西南医院医学检验系

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

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2015年12期

【关键词】

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肠出血性大肠杆菌O157:H7 Z1370 分泌蛋白多克隆抗体原核表达 enterohemorrhagic Escherichia coli （EHEC）

【基金项目】

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国家自然科学基金青年基金资助项目（31100308）,重庆市自然科学基金重点基金资助项目（cstc2012jjB0046）,中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（2362014XKl8）

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为鉴定肠出血性大肠杆菌O157：H7的效应蛋白，本研究利用生物信息学方法预测了1个新的大肠杆菌O157：H7分泌蛋白Z1370，并以EDL933菌株为模板，扩增Z1370基因。将该基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-2，转化大肠杆菌XL-1 Blue，IPTG诱导目的蛋白表达。利用谷胱甘肽琼脂糖殊和PreScission Protease酶纯化目的蛋白。纯化的目的蛋白免疫小鼠制备多抗血清并鉴定多抗血清的免疫反应性和特异性。结果表明，Z1370可能是一个能够分泌至细胞外的效应蛋白。将PCR扩增的Z／370

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