【摘 要】
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目的 建立双重荧光PCR检测HIV前病毒DNA的方法，并应用于婴幼儿HIV感染的早期诊断。方法采用TaqMan技术，组建针对人类核糖核酸酶P（RNaseP）和HIV的长末端重复序列（LTR）基因的双重荧光PCR体系；采用TA克隆技术构建pTG19-T重组质粒作为模板进行该方法灵敏度的评价；采用11例已知健康人的血样和98例已知HIV感染者血样进行该方法的特异性验证；收集2011年1月至2012年9
【机 构】
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浙江省疾病预防控制中心艾防所,杭州310051,浙江省疾病预防控制中心艾防所,杭州310051,浙江省疾病预防控制中心艾防所,杭州310051,浙江省疾病预防控制中心艾防所,杭州310051,浙江省疾
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目的 建立双重荧光PCR检测HIV前病毒DNA的方法，并应用于婴幼儿HIV感染的早期诊断。方法采用TaqMan技术，组建针对人类核糖核酸酶P（RNaseP）和HIV的长末端重复序列（LTR）基因的双重荧光PCR体系；采用TA克隆技术构建pTG19-T重组质粒作为模板进行该方法灵敏度的评价；采用11例已知健康人的血样和98例已知HIV感染者血样进行该方法的特异性验证；收集2011年1月至2012年9月浙江省各地妇幼保健医疗机构上送的96份婴幼儿样本，用新方法进行HIV的早期诊断，并将检测结果与罗氏HIVDNA定性检测试剂盒作比较。结果双重荧光PCR新方法能特异性检测HIV前病毒DNA，特异性为100％，检测灵敏度为100拷贝／反应；新方法和罗氏HIVDNA定性检测试剂盒检测96份婴幼儿样本，结果完全一致（符合率为100％）。结论建立的双重荧光PCR方法经济便捷、特异性好、灵敏度高、结果准确、易于推广，有望用于婴幼儿HIV早期诊断．并为HIV前病毒DNA的检测提供了一个通用技术平台。
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