目的观察三七总皂苷(PNS)与淫羊藿总黄酮(TFE)联合对自然衰老大鼠睾丸生殖功能衰退的影响,探讨其作用机制。方法将30只18月龄SD大鼠随机分为自然衰老组和PNS+TFE低、高剂量组,每组10只。另取10只2月龄大鼠为青年对照组。PNS+TFE低、高剂量组大鼠分别给予10 mg/kg PNS、TFE和20 mg/kg PNS、TFE灌胃,自然衰老组和青年对照组大鼠给予生理盐水灌胃。每周连续给药6 d,共4个月。末次给药后24 h,大鼠称重后处死,取睾丸组织,称取质量,计算睾丸指数。HE染色观察睾丸组织形态,TUNEL法检测大鼠生殖细胞凋亡,Western blot检测睾丸组织抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax和DNA损伤蛋白γ-H2AX的表达。结果与自然衰老组比较,PNS+TFE低、高剂量组衰老大鼠睾丸质量和睾丸指数均明显升高,生精小管组织形态明显改善,睾丸生精细胞凋亡数量明显减少,睾丸组织Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax和γ-H2AX蛋白表达显著下调,Bax/Bcl-2比值降低。结论 PNS与TFE联合给药可延缓自然衰老大鼠生殖功能衰退,其机制可能与抑制睾丸生殖细胞的凋亡和DNA损伤有关。