银杏叶提取物对叔丁基过氧化氢损伤人脐带间充质干细胞的干预作用

来源 :广州中医药大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q525456781
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【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)损伤的干预作用。【方法】取原代培养的h UC-MSCs,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度;采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致h UC-MSCs凋亡的影响,同时检测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10~200mg/L的EGb761预处理3 h可降低h UC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性,浓度超过100 mg/L后EGb761对h UC-MSCs的保护效果无明显提高;100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对h UC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用,保持h UC-MSCs内的SOD活性,并显著降低t-BHP损伤的h UC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】EGb761具有保护被氧化应激损伤的h UC-MSCs的作用,其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。
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