褐藻胶裂解酶在枯草芽胞杆菌中的重组表达及催化特性研究

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为拓展褐藻胶裂解酶在高效、安全的枯草芽胞杆菌体系中的表达,成功构建一株海洋来源的贝特氏菌(Cobetia sp.)WG-007褐藻胶裂解酶枯草芽胞杆菌工程菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-aly-cob,对主要发酵条件进行优化,并对重组酶Aly-Cob的酶学性质进行表征.结果 表明,优化后的工程菌培养温度和初始pH分别为30℃和7.0,发酵培养基为添加15 g/L甘油和30 g/L酵母浸膏的TB培养基.在此条件下,摇瓶发酵48 h褐藻胶裂解酶Aly-Cob酶活为58.62 U/mL,是优化前的2.7倍.重组酶Aly-Cob最适反应温度和pH分别为40℃和7.0,Mg2+、Ca2+、Na+和K+对酶活有促进作用,该酶可特异性地降解褐藻胶及其片段.研究拓展了褐藻胶裂解酶基因在枯草芽胞杆菌中的表达,为褐藻胶裂解酶的应用提供补充和参考.
其他文献
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