【摘 要】
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目的 原儿茶醛（PCA）在软骨细胞衰老中的作用及机制尚不清楚。文章旨在探讨PCA通过介导线粒体自噬延缓软骨细胞衰老的调控效应。方法 将软骨细胞分为空白组（0.1%BSA）、空白+PCA组（BSA+PCA）、模型组（BSA+IL-1β）、IL-1β+PCA组、IL-1β+Mdivi-1组和Mdivi-1+IL-1β+PCA组。使用IL-1β模拟膝骨关节炎（KOA）软骨周围环境并诱导软骨细胞衰老模型，
【基金项目】
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国家自然科学基金（82104893）； 南京中医药大学自然科学基金（XZR2020013）；
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目的 原儿茶醛（PCA）在软骨细胞衰老中的作用及机制尚不清楚。文章旨在探讨PCA通过介导线粒体自噬延缓软骨细胞衰老的调控效应。方法 将软骨细胞分为空白组（0.1%BSA）、空白+PCA组（BSA+PCA）、模型组（BSA+IL-1β）、IL-1β+PCA组、IL-1β+Mdivi-1组和Mdivi-1+IL-1β+PCA组。使用IL-1β模拟膝骨关节炎（KOA）软骨周围环境并诱导软骨细胞衰老模型，按上述分组予以相应干预。检测细胞衰老水平；检测细胞线粒体膜电位水平；荧光倒置显微镜观察线粒体ROS荧光强度；检测细胞内ATP水平；蛋白质免疫印迹检测P21、P53、Acetyl-p53、P62、LC3、PINK1和Parkin表达水平。结果 模型组荧光效果较空白组明显增强（P＜0.05）,ROS水平[（7467.981±2016.985）vs（2434.312±419.396）]明显增高（P＜0.05）。与模型组ROS水平（7467.981±2016.985）相比，IL-1β+PCA组（4157.225±492.308）明显降低（P＜0.05）。在SA-β-gal染色实验中，与空白组阳性细胞百分比比较，模型组明显升高（P＜0.05）;用PCA处理后，模型组的阳性细胞比率较IL-1β+PCA组明显升高（P＜0.05）。与空白组相比，模型组细胞红色荧光强度下降，表明线粒体膜电位下降（P＜0.05）;而给予PCA处理后，IL-1β+PCA组软骨细胞红色荧光强度较模型组增加，线粒体膜电位上升（P＜0.05）。模型组衰老相关蛋白P53、Acetyl-p53、P21的表达较空白组上调（P＜0.05）,自噬相关蛋白P62,LC3、Parkin、PINK1表达下调（P＜0.05）;IL-1β+PCA组衰老相关蛋白P53、Acetyl-p53、P21的表达较模型组下调（P＜0.05）,P62、LC3、Parkin、PINK1表达上调（P＜0.05）。IL-1β+Mdivi-1组自噬相关蛋白表达水平较模型组降低，衰老相关蛋白表达水平增加（P＜0.05）;然而，使用PCA干预后，IL-1β+PCA组软骨细胞自噬水平增强，衰老水平降低（P＜0.05）。结论 PCA能够通过激活PINK1/Parkin增强线粒体自噬，进而延缓软骨细胞衰老。PCA可能为衰老和退行性骨关节病提供一种新策略。
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