【摘 要】
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灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大.本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测灿
【机 构】
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中国海洋大学水产学院,青岛266100;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青
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灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大.本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法.构建合gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝.实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义.
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