【摘 要】
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目的研制EB(Epstein-Barr)病毒基因工程疫苗。方法构建了含有Epstein-Barr病毒(EBV)膜蛋白(MA)基因的重组表达质粒pCMV/MA,转染CHO细胞,研究表达产物的生物学性状,及培养液中不同血清含量、冻存、G418对CHO细胞分泌MA的影响。结果获得两个稳定表达MA的细胞株。免疫印迹检测表达产物的分子量约为340kD和220kD,间接免疫荧光和免疫斑点确定表达产物能与抗MA
【机 构】
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100052 北京 中国预防医学科学院病毒学研究所,100052 北京 中国预防医学科学院病毒学研究所,100052 北京 中国预防医学科学院病毒学研究所
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目的研制EB(Epstein-Barr)病毒基因工程疫苗。
方法构建了含有Epstein-Barr病毒(EBV)膜蛋白(MA)基因的重组表达质粒pCMV/MA,转染CHO细胞,研究表达产物的生物学性状,及培养液中不同血清含量、冻存、G418对CHO细胞分泌MA的影响。
结果获得两个稳定表达MA的细胞株。免疫印迹检测表达产物的分子量约为340kD和220kD,间接免疫荧光和免疫斑点确定表达产物能与抗MA的单克隆抗体特异性结合,用薄层扫描和Lowry法计算MA的表达量为每天1.9μg/ml。经纯化的MA免疫小鼠,在血清中检测到抗MA的特异性抗体。
结论为开发有效的表达系统用于EB病毒基因工程疫苗的生产提供有利的实验基础。
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