p53基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miRNA-2127靶向关系的验证

来源 :山东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cuthberthirsch

【摘要】

：

为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORT^

【作者】

：

张玉霞袁小远王友令孟凯

【机构】

：

山东省农业科学院家禽研究所

【出处】

：

山东农业科学

【发表日期】

：

2019年1期

【关键词】

：

p53 miRNA-2127 双荧光素酶报告系统

【基金项目】

：

山东省自然科学基金项目(ZR2017BC039);山东省农业科学院高层次人才及创新团队引进计划项目;山东省农业科学院青年科研基金项目(2015YQN61)

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为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORT^TM双荧光素酶报告载体中,构建野生型与突变型重组双荧光素酶报告质粒。将293T细胞分为4组,分别共转染野生型报告质粒+阴性对照(NC)、野生型报告质粒+miRNA-2127、突变型报告质粒+NC、突变型报告质粒+miRNA-2127。检测各组细胞中荧光素酶活性差异,结果显示:共转染了野生型报告质粒+miR

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