【摘 要】
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目的探讨大鼠慢性支气管炎（chronic bronchitis，CB）诱导产生抗中性粒细胞胞质抗体（antineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）的机制。方法用烟熏法联合气管内注入脂多糖（LPS）诱导建立CB大鼠模型，LPS和佛波酯（PMA）反复刺激CB发作。分为正常对照组（n=5）、对照+PMA组（n=5）、CB组（n=5）、CB+PMA组（n=6）。检测
【机 构】
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青岛大学附属医院肾病科，青岛 266555（现在日照市人民医院肾内科，山东省日照市 276800）,青岛大学附属医院肾病科，青岛 266555,青岛大学附属医院泌尿外科与男科学重点实验室，青岛 266
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目的探讨大鼠慢性支气管炎（chronic bronchitis，CB）诱导产生抗中性粒细胞胞质抗体（antineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）的机制。
方法用烟熏法联合气管内注入脂多糖（LPS）诱导建立CB大鼠模型，LPS和佛波酯（PMA）反复刺激CB发作。分为正常对照组（n=5）、对照+PMA组（n=5）、CB组（n=5）、CB+PMA组（n=6）。检测4组大鼠肾功能，HE染色观察大鼠肺、肾组织病理变化，ELISA法检测血清中髓过氧化物酶（MPO）-ANCA、蛋白酶3（PR3）-ANCA和中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）标志物瓜氨酸化组蛋白H3（CitH3）的水平。采用Spearman秩相关分析CitH3与MPO-ANCA的相关性。应用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜观察MPO、CitH3在肺脏、肾脏组织的表达和定位。
结果（1）CB+PMA组大鼠血清CitH3、MPO-ANCA水平随时间变化均呈上升趋势，第6周末CitH3、MPO-ANCA水平均高于正常对照组、CB组（均P<0.05）。大鼠血清CitH3水平与血清MPO-ANCA水平呈正相关（rs=0.490，P=0.024）。（2）CB组、CB+PMA组大鼠肺组织存在CB的病理表现，正常对照组、对照+PMA组大鼠肺组织未见明显异常。CB+PMA组大鼠肾脏组织中肾小球内及肾小管周围大量淋巴细胞浸润，炎性细胞黏附于血管壁，但尚未发现肾小球坏死。正常对照组、对照+PMA组和CB组大鼠肾脏组织未见明显异常。（3）CB+PMA组大鼠肺脏、肾脏冰冻组织免疫荧光双染激光共聚焦显微镜可观察到NETs沉积。
结论CB大鼠在反复感染过程中，NETs在体内发生蓄积，其所含有的MPO抗原组分反复暴露，最终可导致MPO-ANCA的产生。
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